结直肠癌细胞特异性结合短肽及表面抗原模拟位研究

研究动向:结直肠癌细胞特异性结合短肽及表面抗原模拟位研究

研究时间：	2007
研究单位：	广东省人民医院
研究者：	姚学清
研究领域:
基础医学
内容简介:
研究主要内容：1）用人结直肠癌细胞LoVo和HT29筛选噬菌体12肽库，筛选出能和人结直肠癌细胞结合的噬菌体克隆，进行DNA测序，确定保守序列并进行阳性克隆的鉴定。2）短肽的合成、短肽与化疗药物的交联、体内外检测短肽的导向作用。3）以人结直肠癌细胞特异性结合的噬菌体克隆为靶筛选环7肽库，对其进行计算机模拟。关键技术：1）筛选噬菌体12肽库的筛选，人结直肠癌细胞结合的噬菌体克隆，阳性克隆的鉴定。2）短肽的合成、短肽与化疗药物的交联、体内外检测短肽的导向作用。3）噬菌体克隆为靶筛选环7肽库，得到的模拟肽进行计算机模拟。4）获得特异性抗体的分析。　　特色及创新：1）用人结直肠癌细胞株为靶分子，直接对肽库进行筛选，寻求其亲和短肽。2）给短肽噬菌体克隆标记生物素，用来建立生物素-亲和素的噬菌体酶联免疫分析检测体系（BA　ElISA）,这在噬菌体克隆筛选噬菌体肽库得到新的噬菌体克隆检测中，避免了相同二抗所致的假阳性。4）用得到的噬菌体环7肽克隆作为抗原免疫动物，得到抗体的方法更为方便，为免疫学方法治疗人结直肠癌打下基础。