基于肿瘤微环境在胰腺导管腺癌神经浸润中的重要作用，本课题拟在既往研究的基础上，设想从肿瘤微环境的整体性角度出发，采用整体实验与离体实验相结合的方法，综合利用激光显微切割、基因芯片、免疫组化、细胞培养、荷瘤裸鼠和其他相关分子生物学等技术，从细胞、动物、蛋白及基因水平探讨神经浸润与肿瘤微环境之间的关系。首先采用显微切割技术捕获神经浸润处癌细胞，用基因芯片技术检测其基因表达谱，筛选出关键基因作为分子靶点，然后应用免疫组化、原位杂交、PCR等技术检测其在胰腺癌标本和培养的癌细胞中蛋白、mRNA或DNA表达的改变，评价其在神经浸润中的作用，进一步阐明神经浸润的相关机制。在此基础上，把癌细胞与鸡胚神经节细胞共培养或将其移植到裸鼠坐骨神经，观察分子靶点的阻断剂在离体和整体实验水平对胰腺癌嗜神经性的影响，评价其作用，将为临床上控制胰腺癌侵袭、复发和转移提供新途径，具有重要的理论意义和临床应用价值。创新点：1.显微切割获取神经浸润处癌细胞，分析其基因表达谱，排除非特异性因素的影响，更具特异性和针对性，为本项目的独到之处。2.强调神经浸润与肿瘤微环境的互动关系及其整体性，结果更贴近实际。