肿瘤干细胞是肿瘤发生、发展、侵袭、耐药、转移与复发的关键。在本课题组前期研究中;采用BrdU与3H-TdR双标记小鼠喉组织,检测到小鼠喉组织存在标记滞留细胞。那么,喉癌细胞中是否存在具有干细胞特性的肿瘤细胞, 化疗药物诱导NSP细胞转化为SLCC的机制是什么?除了影响基因组不稳定性,我们认为化疗药物可能通过影响Wnt和Notch信号传导通路的异常表达, 使普通喉癌细胞获得干细胞特性。本实验拟利用流式细胞术分选喉癌Hep-2细胞中的SP细胞,通过克隆形成率测定、NOD/SCID鼠成瘤实验等进行鉴定;并通过化疗药物DDP或Mitomycin C作用于NSP细胞诱导其转化为SLCC,采用光谱核型分析,实时定量RT-PCR、western blot检测等方法,旨在获得喉癌相关干细胞生物学特性的可靠证据。本研究项目将分选并鉴定喉癌SP细胞,探讨化疗药物致喉癌NSP细胞转化为SLCC的可能机制。 |