大面积深度烧伤病人仍有较高死亡率,重要原因之一在于缺乏有效的创面覆盖物。临床实践发现:自、异体皮肤混合移植方法,可有效覆盖创面并促进创面愈合。但目前对自、异体皮肤混合移植后,促进创面愈合的机理及异体皮的最终确切转归仍不明了,影响了该方法的应用及推广。 本研究模拟临床,建立自、异体皮肤混合移植的动物模型,利用聚合酶链反应(PCR)、荧光原位杂交(FISH)方法检测雌性受体体内雄性移植物Y染色体,DNA基因分型检测移植物基因片段,绿色荧光转基因动物结合活体成像技术等方法,观察混合移植后异体皮肤的转归。以流式细胞检测技术检测各移植组外周血CD4+CD25+调节性T细胞表达情况,以RT-PCR和Western blot检测混合移植后异体皮肤组织中Foxp3的mRNA和蛋白表达水平;以Foxp3基因敲除小鼠为自、异体皮肤混合移植模型,并与普通小鼠模型对比研究,了解CD4+CD25+调节性T细胞在皮肤混合移植中的作用。本研究利用不同的异体移植物标记跟踪方法,阐明皮肤混合移植后创面愈合的过程及机理,并首次从调节性T细胞角度对自、异体皮肤混合移植免疫耐受现象进行研究,为混合皮肤移植后免疫耐受现象机理的研究提供新的思路,为解决大面积深度烧伤创面的覆盖,促进愈后,提高创面愈合质量提供新的可靠方法。
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