生物医药技术

研究动向:豆豉枯草芽孢杆菌纤溶酶的天然底物研究
研究时间: 2010
研究单位: 华南理工大学生物科学与工程学院
研究者: 崔堂兵
研究领域:
医药生物技术
内容简介:
    纤溶酶又叫溶纤酶、溶栓酶,因其能水解纤维蛋白和溶解血栓而得名。该酶广泛存在于人及许多其他动物体内的纤溶系统中,它的生理功能以及在细胞内活性的调控机制已经基本清楚,天然底物是纤维蛋白原水解后产生的纤维蛋白,而纤维蛋白是形成血栓的主要物质。此外,在许多微生物中也发现了纤溶酶,其中以芽孢杆菌属菌居多,但微生物纤溶酶对产生菌本身有何生理功能及酶活性的调控机制仍不清楚,其天然底物也未见任何报道。微生物纤溶酶对产生菌本身有何生理功能及酶活性的调控机制方面的研究,我们已经获得了国家自然科学基金的资助(项目名称:枯草芽孢杆菌纤溶酶的生理功能及活性调控机制研究;项目批准号:30970044 )。本课题拟以从广东豆豉中分离的产纤溶酶(Douchi Fibrinolytic Enzyme, DFE)的枯草芽孢杆菌DC-12为对象,提取其基因组NDA,酶切后转入毕赤酵母,建立酵母表达文库,用脱水纤溶酶为诱饵,从文库中钓取能与酶结合的肽,制备肽及其抗体,从DC-12发酵液和菌体的蛋白提取液中分离出能与抗体结合的抗原(候选底物),然后对候选底物进行确定和鉴定。上述研究成果将在国内外首次揭示和阐明微生物体内纤溶酶的天然底物及纤溶系统,为微生物纤溶酶相关的生物化学和微生物生理学研究提出创新性的发现,同时也为进一步提高纤溶酶的发酵生产水平提供强有力的理论依据。



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