预防医学
研究动向:运用荧光定量PCR检测技术开展霍乱监测和控制
| 研究时间： | 2006 |
| 研究单位： | 广州市越秀区疾病预防控制中心 |
| 研究者： | 湛柳华 |
| 研究领域: | |
| 预防医学 | |
| 内容简介: | |
| 主要内容：本项目根据霍乱弧菌的四种毒力基因的保守序列来设计荧光探针和引物,建立实时荧光定量PCR检测体系,对霍乱常规监测和疫情处理的样品中霍乱弧菌的菌型及毒力进行分析，可区分非流行株与流行株，利用此技术可对疑似霍乱病人进行快速诊断，及时发现病例，为防止疾病漫延，及时疫情控制具有十分重大的现实意义。另外利用该技术灵敏度高，用于开展环境水体和海水产品中霍乱弧菌的检测，掌握其分布和流行规律，为疫情预测、制定防治措施提供科学依据。 关键技术：根据基因的保守序列设计TaqMan探针及与之相配套的常规引物；优化荧光定量PCR实验的反应条件，建立标准高灵敏的使用荧光定量PCR技术进行霍乱弧菌检测的体系；通过实时监控PCR体系中每个循环的荧光信号，对样本中初始模板进行定量分析。 特色和创新之处：运用实时荧光定量PCR技术进行霍乱弧菌快速检测，有别于采用常规细菌分离培养方法和血清学凝集试验做霍乱弧菌检测和鉴定；可对样品中霍乱弧菌的菌型及毒力进行既定性又定量的分析，可识别外环境样品是非流行株与流行株；创新地运用荧光定量PCR技术检测霍乱弧菌毒素基因，填补国内该项技术的空白，必将在全国起到示范作用。 | |
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