预防医学
研究动向:利用反向遗传技术制备结核分枝杆菌免疫优势抗原ESAT-6
| 研究时间： | 2007 |
| 研究单位： | 广东省实验动物监测所 |
| 研究者： | 罗琴芳 |
| 研究领域: | |
| 预防医学 | |
| 内容简介: | |
| 根据目前结核分支杆菌免疫及检测中难题，本研究使用生物信息学方法，多株比对，设计特异引物，克隆BCG不具有的在结核分支杆菌中起主要致病作用的重要的T细胞抗原：早期分泌性抗原靶ESAT-6。将ESAT-6基因嵌入禽流感病毒NA全基因，在已经建立的禽流感弱毒（H9N2）反向遗传操作技术平台上，构建嵌合基因双向转录表达载体、共转染细胞，获得能共表达ESAT-6的禽流感病毒。最终利用禽流感病毒在细胞中的快速增殖，快速、高效地制备具有生物活性的ESAT-6，为结核分支杆菌的主要免疫原及诊断特征物的开发和蛋白结构与功能研究、致病机理探索打下良好的基础。 本研究以最新生物技术－反向遗传技术、以禽流感弱毒为载体，通过病毒本身的快速增殖快速、高效表达具有生物活性的ESAT-6。为ESAT-6及其他功能蛋白的制备提供很好的思路。该方法制备的ESAT-6弥补了目前研究方法的缺点。本课题既集中了生物信息学、分子生物学、蛋白质学、病毒学、细胞工程、反向遗传学等多项高新生物技术，又密切结合实际，实用性强，操作简便、成本低廉。该技术具有很好的开发前景。 创新之处在于利用反向遗传技术将禽流感病毒与结核分支杆菌重要免疫原ESAT-6有机整合，随着病毒的大量增殖，快速高效制备有活性的ESAT-6。目前在国内外尚没有报道。该技术属于国际领先。 | |
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