名称:   人偏肺病毒实时荧光PCR检测试剂盒 
 
申请（专利）号:    CN200810027105.0  申请日:    2008.03.31 
 
授权（公告）号:    CN101550454B  授权（公告）日:    2013.01.23 
 
申请（专利权）人:    中山大学达安基因股份有限公司 
 
地址:    510665 广东省广州市高新技术产业开发区香山路19号 
 
发明（设计）人:    何瑰;王方金;周高英;李明;程钢;何蕴韶 
 
        
 
摘要: 
 
本发明涉及实时荧光PCR试剂盒，特别是涉及利用实时荧光PCR技术检测人偏肺病毒(Human Metapneumovirus，hMPV)的试剂盒。通过本发明中的试剂盒实现了对人偏肺病毒的定量或定性检测，可广泛应用于人偏肺病毒感染的辅助诊断。       
 
主权项: 
 
一种实时荧光RT‑PCR一步法检测人偏肺病毒的试剂盒，该试剂盒包括：(1)RNA提取试剂、RT‑PCR反应液、RT‑PCR反应酶系、经焦炭酸乙二脂(DEPC)处理的纯水、定量参考品、阴性质控品、阳性质控品，和(2)分隔并集中包装这些试剂瓶或管的包装盒，其中RT‑PCR反应液由5×RT‑PCR缓冲液、正向引物、反向引物、寡核苷酸探针、DEPC水组成，其特征在于用于靶多核苷酸扩增的正向和反向引物的序列分别是5’‑CATGCCCACTATAAAAGGTCAG‑3’和5’‑CACCCCAGTCTTTCTTGAAA‑3’；靶多核苷酸扩增和监测体系的寡核苷酸探针的序列为5’X‑TTAATATCCCACACCAATGACATGC‑Y 3’、5’X‑TTAATATCCCACACCAATGGCATGC‑Y 3’、5’X‑TTAATATCCCACACCAGTGACATGC‑Y 3’和5’X‑TTAATATCCCACACCAGTGGCATGC‑Y 3’，其中X/Y表示荧光标记检测体系，X表示与寡核苷酸探针结合的荧光发生基团，Y表示与寡核苷酸探针结合的荧光淬灭基团，包括能够与靶多核苷酸结合并且两末端分别结合的有荧光发生基团和荧光淬灭基团的寡核苷酸探针；其特征还在于阴性质控品为生理盐水、正常人或其它病毒感染的鼻咽分泌物样本；RT‑PCR反应酶系包含逆转录酶mMLV、Taq酶和RNA酶抑制剂。