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转基因玉米EVENT98140及其衍生品种的LAMP检测引物组、检测试剂盒及检测方法
名称: 转基因玉米EVENT98140及其衍生品种的LAMP检测引物组、检测试剂盒及检测方法
申请(专利)号: CN201210128803.6 申请日: 2012.04.28
授权(公告)号: CN102634593B 授权(公告)日: 2013.09.25
申请(专利权)人: 广州迪澳生物科技有限公司;广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心
地址: 510663 广东省广州市科学城科学大道182号创新大厦C2-1303
发明(设计)人: 李志勇;蔡颖;陈源树;唐羿;肖艳文;石磊
摘要:
本发明公开了一种转基因玉米EVENT98140及其衍生品种的LAMP检测引物组、检测试剂盒及检测方法。检测引物组包括四条特异性引物;检测试剂盒包括引物液、反应液、DNA聚合酶和对照;试剂盒还可以有显色剂。其检测方法是通过提取待检玉米品种的DNA、采用四条特异性引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶,在63~65℃对样品DNA模板进行扩增,短时间扩增效率可达到109~1010个拷贝,其鉴定采用加入SYBRGreenI观察颜色变化或者利用浊度仪观察反应管内沉淀的浊度变化判断扩增与否,确定待检玉米品种是否含有或为转基因玉米EVENT98140及其衍生品种。本发明具有快速高效、操作简便、高特异性、高灵敏度、鉴定简便、适合现场检测等优点,适于推广应用。
主权项:
转基因玉米EVENT98140的LAMP检测引物组,包括外引物1、外引物2、内引物1和内引物2,其核苷酸序列分别如下所示:外引物1:GTCGTCGATGCATATGTGT(SEQ ID No:1);外引物2:AATTCTCGTACGTACAGCAC(SEQ ID No:2);内引物1:GTCATCCATGAGTCAACCGTGTTACCTGCTGCTGGCTTAT(SEQ ID No:3);内引物2:AGATAGTAGTAGCGGCTCGTCAAATAAGGTGGAATCAGTCGC(SEQ ID No:4)。