名称:      青蟹双顺反子病毒检测用引物组、检测方法和快速诊断试剂盒

申请（专利）号:       CN201210223292.6     申请日:       2012.06.29

授权（公告）号:       CN102766700B     授权（公告）日:       2013.12.25

申请（专利权）人:       中国水产科学研究院南海水产研究所

地址:       510300 广东省广州市海珠区新港西路231号

发明（设计）人:       郭志勋;张迪;冯娟;苏友禄;徐力文


摘要:

本发明公开了一种青蟹双顺反子病毒检测用引物组、检测方法和快速诊断试剂盒，该引物组由如下四条引物组成：外引物F3、外引物B3、内引物FIP和内引物BIP。本发明的引物组、检测方法和试剂盒均可高效高特异性地检测青蟹双顺反子病毒，本发明引物组特异性强，本发明检测方法检测成本低、耗时短、产率高，特异性高，且阴阳性结果显色差异显著，验证率高，更加明显可靠；本发明中的试剂盒建立了一套经过优化的反转录—环介导等温扩增反应体系，可用于青蟹类养殖过程中各时期的青蟹双顺反子病毒跟踪检测，避免病毒传播流行，提高科学管理效率，具有很高的实用价值。     

主权项:

一种青蟹双顺反子病毒检测用引物组，其特征在于该引物组由如下四条引物组成：内引物FIP，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；内引物BIP，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示；外引物F3，其核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；外引物B3，其核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。 2. 一种青蟹双顺反子病毒快速诊断试剂盒，其特征在于：该试剂盒包含如下组分：(1) 权利要求1中所述的引物组；(2) 阳性对照品：含有青蟹双顺反子病毒外壳蛋白基因的质粒；(3) 显色液；(4) LAMP反应液；(5) Bst DNA聚合酶。3．根据权利要求2所述的青蟹双顺反子病毒快速诊断试剂盒，其特征在于：所述的显色液为SYBR Green I。4．根据权利要求2所述的青蟹双顺反子病毒快速诊断试剂盒，其特征在于：LAMP反应液含有1×反应缓冲液、0.2~1.8 mM dNTPs、0~1.6 M 甜菜碱和4~14µM  MgSO4。