名称:      直接同时检测土壤中根结线虫和肾形肾状线虫的引物及方法

申请（专利）号:       CN201210231272.3     申请日:       2012.07.05

授权（公告）号:       CN102766687B     授权（公告）日:       2013.12.25

申请（专利权）人:       华南农业大学

地址:       510642 广东省广州市天河区五山路483号

发明（设计）人:       廖金铃;胡茂秀;卓侃


摘要:

本发明公开了直接同时检测土壤中根结线虫和肾形肾状线虫的引物及方法，属于分子生物学检测技术领域。该直接同时检测土壤中根结线虫和肾形肾状线虫的引物包括SEQIDNO:1~6所示核苷酸序列。本发明还公开了一种直接同时检测土壤中根结线虫和肾形肾状线虫的方法，具体是直接提取土壤中DNA，纯化后作为模板使用线虫的通用引物D2A和D3B进行第一轮PCR，再以该产物为模板，SEQIDNO:3~6所示引物进行第二轮PCR，通过PCR产物片段大小判定样品中是否含有根结线虫和肾形肾状线虫。本发明的引物灵敏、特异性强，检测方法可以大大节省检测时间且结果准确可靠，在根结线虫和肾形肾状线虫快速检测方面具有很高的实际应用价值。     

主权项:

一组直接同时检测土壤中根结线虫和肾形肾状线虫的PCR引物，其特征在于核苷酸序列如下：线虫的通用引物为D2A和D3B；D2A：SEQ ID NO:1；D3B：SEQ ID NO:2；巢式PCR扩增引物为NF3、NR0、MF0和RF4；NF3：SEQ ID NO:3；NR0：SEQ ID NO:4；MF0：SEQ ID NO:5；RF4：SEQ ID NO:6。