基础医学
研究动向:人组织因子siRNA载体的构建以及其在血栓形成和PAR-2信号转导的应用研究
| 研究时间： | 2007 |
| 研究单位： | 广州军区广州总医院 |
| 研究者： | 邱健 |
| 研究领域: | |
| 基础医学 | |
| 内容简介: | |
| 组织因子（TF）将成为防治血栓性疾病的新靶点，本课题根据RNA干扰（RNAi）原理，利用化学合成的方法合成TF siRNA序列，在特异的细胞株（CHO）中筛选出高效的TF siRNA基因序列，采用分子克隆技术，构建含人启动子的TF siRNA表达载体，并利用构建的质粒载体，观察原代培养的人内皮细胞TF基因缺失现象，比较凝血因子Ⅶ（FⅦ）和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）刺激前后，内皮细胞TF凝血活性、mRNA和蛋白表达变化，以及应用蛋白酶激活受体-2（PAR-2）的小分子激动剂和抑制剂作用下，流式细胞仪检测内皮细胞钙离子浓度、RT-PCR和蛋白电泳分析蛋白酶C、磷脂酰肌醇3激酶和丝裂原激活的蛋白酶蛋白的变化，开发一种新型、高效和经济的用于研究TF的实验材料，证实抑制TF活性和表达是防治血栓形成的新靶点，为研究以TF为靶点的新型抗栓药物提供实验工具，阐明TF和PAR-2信号通路是血栓形成的重要机制，奠定RNAi技术在信号通路和临床诊治中的应用基础。 | |
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