人DNA 拓扑异构酶 I的试产和抗癌化合物筛选平台建立

研究动向:人DNA 拓扑异构酶 I的试产和抗癌化合物筛选平台建立

研究时间：	2006
研究单位：	广州市微生物研究所
研究者：	张高贤
研究领域:
医药生物技术
内容简介:
为了满足国内外筛选抗肿瘤药物以及肿瘤研究等对人拓扑异构酶的需求，把该酶基因克隆到毕赤酵母并表达生产。调整拓扑异构酶IN端核定位信号序列的删除范围，使该酶的核定位功能受最大限度抑制，降低自我抑制作用；增加过氧化质体定位序列，进一步提高酶的产量；对工程酵母生长和重组酶产生的最适培养基、温度、pH等进行优化试验；研究工程酵母生物量控制、甲醇诱导的时机和用量对酶活力形成量的影响；研究酶的回收工艺及其优化；应用所产拓扑异构酶I抑制剂筛选模型开展海洋微生物和内生菌代谢的活性筛选，建立起可长期服务的筛选平台，向国内外供应拓扑异构酶I。本项目应用的表达宿主、分泌型表达、糖基化表达、以及核定位、过氧化质体定位序列应用等具有创新性，本项目完成后将成为该酶的国内首家供应者，向国外出售会有很强竞争力。