研究内容:本项目研究中,将利用2萘酸单加氧酶基因簇,通过酶分子体外定向进化手段,定向改造2萘酸单加氧酶羟化吲哚的区域选择性,研究2萘酸单加氧酶生物催化生成靛蓝和靛玉红的手性合成途径,实现2萘酸单加氧酶手性合成靛玉红的功能基因的定向进化,并实现进化后的2-萘酸单加氧酶的高效表达、以及其定向高效催化抗癌药物靛玉红的合成能力。
创新点和关键技术:
1.材料专有:2-萘酸单加氧酶基因是本实验室研究发现的具有分子进化潜力的功能基因。
2.研究方法新颖:本项目采用酶分子定向进化工程, 对2-萘酸单加氧酶进行分子定向改造:扩展定向进化的途径和突变的定向筛选方法;发展小型化、自动化高通量筛选和选择模式。
3.技术首创:本项目通过分子体外定向进化,可以提高2-萘酸单加氧酶生物催化效率, 用于手性合成抗癌药物靛玉红。采用生物催化手性合成靛玉红在国内属于首创。 |