以CHO细胞作为宿主,利用非病毒载体瞬时基因表达(Transient Gene Expression)重组蛋白是一种可在短时间内获得大量重组蛋白的新技术。该技术可以用于蛋白组学基础研究,还可以用于蛋白药物的开发研究。目前已可达到上百升的规模,产量50mg/L 以上,但在我国,该项技术的研究基本还是空白。
本课题以肿瘤治疗药物-重组sPDGFR为模式蛋白探索大规模瞬时基因表达重组蛋白的方法。已有实验证明重组可溶性PDGFR(受体的胞外段,sPDGFR)是正常PDGFR的竞争性多肽,可以抑制肿瘤细胞的生长和转移。使用CHO瞬时表达技术可以在短时间内获得大量的蛋白来完成临床前实验。
在此过程中采用国际先进的高通量震荡式细胞培养反应器(TubeSpin)系统进行中试工艺的优化,进而将生产规模扩大到工作体积10L,建立瞬时表达重组蛋白的技术平台。 |