本项目将开展生物絮凝剂高产菌株谷氨酸棒杆菌A.1l的遗传操作体系的建立与絮凝剂代谢相关基因的克隆、鉴定和功能分析的工作

1、A.1l的遗传操作体系的建立：采用转座子插入突变方法建立该菌的突变体库，筛选其絮凝剂高产或低产的突变株。

2、絮凝剂代谢相关基因的克隆、鉴定和功能分析：提取筛选得到的A.1l突变株的总DNA，酶切总DNA后将DNA片段与相应载体连接，转化大肠杆菌感受态细胞，培养转化子细胞提取质粒。以提取的质粒为模板，根据插入的转座子序列设计引物，扩增插入质粒的外源DNA片段序列，得到与絮凝剂代谢相关基因的序列信息。对所得到的基因序列进行生物信息学分析，预测其编码蛋白的结构及功能，进一步构建单个基因的突变株及多个基因的多突变株，精细分析各个基因的功能，完整了解该菌合成絮凝剂的过程，为从分子水平构建生物絮凝剂的高产菌株奠定理论基础。