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达博公司单项技术服务
来源:borui@yahoo.com.cn 日期:2009-08-20 15 【字体:
公司可以为你提供课题设计,包括文献搜索、查阅,分析实验思路的合理性,证明所需要的方法和检测所需的指标等等… ,还可以为您提供完成整体实验的全过程。所涉及的领域有:分子生物学、细胞生物学、形态学、免疫学、药物筛选、动物模型构建等各项技术服务。 以下为各单项的技术服务: 一、 DNA样本制备/ RNA样本制备 最好使用新鲜的样品或取样后立即在低温下(-20℃或-70℃)冷冻保存的样品,避免反复冻融,因为这样会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。 ①血液样本 ②培养细胞样本 ③组织样本 1、DNA提取 2、RNA提取 样品应该如何运输? 样品运输要求在低温下进行,一般采用保温性能较好的容器,如:泡沫塑料盒、保温瓶等,并且在容器中加入足够的预先于液氮或者干冰,彻底密封好容器。 样品运输中需要注意的问题:样品保存管的密封性;保存管的标记明确且不易脱落;样品运输中样品存放的环境温度(样品必须保存于干冰或液氮中,根据运输时间可以适当选择);同时附上样品的描述和实验方案。 RNA样品的运输: RNA保存在70%的乙醇相对比较稳定。推荐RNA提取后保存于70%的乙醇和0.1M醋酸钠中低温下进行运输。 二、实时定量荧光PCR、RT-PCR、定性PCR、半定量PCR 检测技术服务 1. 样品提取。从提供的组织或者细胞中提取RNA;或者直接提供足量的cDNA样品以保证Realtime PCR实验使用; 2. Realtime引物或者探针的设计。客户需提供基因全序列或者基因登陆号,帮助设计Realtime引物序列或者探针序列; 3. 绝对定量标准品的制备。在没有提供标准品的基础上,制备绝对定量的标准品; 4. Realtime PCR并进行数据的输出,如有必要可以协助客户进行相关的数据处理和分析。 三、基因克隆 1、载体构建 客户需要提供相关的基因号,图谱,电子版的全序列 a.原核表达载体构建:(包括TA克隆) b.真核表达载体构建: c.病毒载体构建:慢病毒,腺病毒,逆转录病毒 d.shRNA载体构建 e. 病毒包装、产病毒、病毒滴度测定、病毒浓缩等相关的技术服务。 f. 腺病毒大规模培养扩增及纯化服务 2、定点突变 a.大片段缺失突变 b.构建突变载体 收费以突变碱基数计算 3、基因表达 ①蛋白表达与纯化 收费以每个样本消耗的培养基升数计算 包括大肠杆菌、酵母细胞等 内容包括:从调基因、 RNA提取、引物设计、基因扩增、亚克隆、测序、构建表达载体、蛋白表达、蛋白纯化和Westen Blot蛋白印迹等。 ②真核细胞表达 收费按转染的样品数计算 4、全基因的人工合成 对于那些一般试验手段无法获得的目的基因,可以进行人工合成。 我们可提供的载体列表: 真核表达载体:pcDNA3.1系列,pCMV系列,peGFP等 原核表达载体:PET系列,PQE系列,PGEX系列等 病毒载体:腺病毒、慢病毒、逆转录病毒载体。 shRNA载体:u6启动子载体,H1启动子载体、CMV启动子载体。 四、 抗体制备服务 免疫动物种属:羊、兔、大鼠、小鼠。 我们可以提供的服务: 1?单、多克隆抗体制备。 2?单、多克隆抗体纯化 4?提供抗体的分型服务 5?提供抗原的制备服务 6?若客户需要,我们可以提供短期内高速制备服务(12周) 7?可以进行多抗血清及其抗体的同时制备 五、 Western Blot检测/免疫沉淀 公司方提供: 1 预实验结果 2 正式实验结果 3 如客户只需要进行预实验研究,我方可只代理预实验业务并提供结果。 4 实验周期与费用: 六、免疫组化检测 我们提供的免疫组化技术服务:包括对组织切片底物显色,借助显微镜拍摄,在细胞、亚细胞水平对相应抗原(蛋白等各种生物分子)进行定性、定位检测。 提交结果包括图片、切片、初步的结果分析。 七、细胞培养、转染与细胞株构建服务 细胞培养、基因克隆、表达包括RNA提取、引物设计、基因扩增、亚克隆、测序、构建表达载体、筛选高表达细胞株等。 八、细胞凋亡检测 Tunel细胞凋亡检测 公司最终提供:完成实验的切片、照片和实验流程(word文档)。 其它凋亡检测如:光学显微镜观察、电子显微镜观察、荧光显微镜、细胞爬片TUNEL酶联染色、Hoechst 33342/33258双染、DAPI荧光染色、Annexin V-FITC/EGFP/PI双染、DNA Ladder琼脂糖电泳、Western Blot。 九、药品冻干服务 1.小量冻干 2.大量冻干 十、动物模型构建、动物实验 十一、肿瘤药物筛选 十二、其它技术服务 共聚焦检测项目(钙离子、细胞膜电位、线粒体膜电位、细胞间通讯、荧光样品的三维重建、荧光信号的共定位、荧光强度的定量检测等);电镜检测(样品制备和观察);流式检测项目(凋亡、细胞周期、CD抗原检测等);双向电泳。

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